蔬菜農(nóng)殘快速檢測(cè)儀在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)系。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用蔬菜農(nóng)殘快速檢測(cè)儀測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值,計(jì)算出抑制率,通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
蔬菜農(nóng)殘快速檢測(cè)儀使用方法
1、開(kāi)機(jī)
打開(kāi)儀器背面電源開(kāi)關(guān),儀器顯示開(kāi)機(jī)畫(huà)面,按畫(huà)面提示操作,進(jìn)行檢測(cè)之前先校正儀器零點(diǎn)
2、試劑配制2.1緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.6),常溫保存。
顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。
底物:取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存;
或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時(shí)取20μL,4℃冰箱保存。2.4、膽堿酯酶:酶制劑無(wú)需配制,可直接取用,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。
3、樣品提取
取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成25px左右見(jiàn)方的碎片,塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL緩沖液,振蕩1~2min,倒出提取液,靜置2min,待測(cè)。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過(guò)濾后再測(cè)。
4、測(cè)試
對(duì)照測(cè)試:于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應(yīng)10min后加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中,及時(shí)放入儀器的測(cè)量室通道中。按<對(duì)照>鍵,顯示屏延遲設(shè)定秒數(shù)后,測(cè)量時(shí)間開(kāi)始,計(jì)時(shí)完畢,顯示屏顯示對(duì)照吸光度增量(ΔΑ),并提示完成。在進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí),其他通道可同時(shí)進(jìn)行樣品測(cè)試。
樣品測(cè)試:于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測(cè)液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應(yīng)10min后加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色皿中,及時(shí)放入儀器的測(cè)量室通道。按<樣品>鍵,顯示屏下方延遲設(shè)定秒數(shù)后,測(cè)量時(shí)間開(kāi)始,計(jì)時(shí)完畢,顯示屏顯示樣品吸光度增量(ΔΑ)及抑制率,并提示合格或超標(biāo)。數(shù)據(jù)可進(jìn)行自動(dòng)保存,如有需要按<打印>鍵打印。