雙光束紫外可見分光光度計(jì)是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度計(jì)定性和定量分析的基礎(chǔ)。
雙光束紫外可見分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng):
(1)在開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
?。?)吸收池必須潔凈,并注意配對(duì)使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí),需選用石英比色皿。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
?。?)測(cè)試品標(biāo)注測(cè)試物質(zhì)以及配置濃度,且吸收度在0.3~0.7之間為宜。測(cè)試中,因采用測(cè)試品溶劑為空白對(duì)照:1cm石英吸收池,由儀器規(guī)定波長(zhǎng)或者規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)自動(dòng)掃描測(cè)定,測(cè)吸收度以核對(duì)測(cè)試品吸收峰位置是否正確。
?。?)選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對(duì)于大部分被測(cè)品種,可以使用2nm縫寬。
?。?)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記。